Veterinærer som mistenker Cushings syndrom vil ta blodprøver for å bekrefte diagnosen. Det er også anbefalt å ta blodprøver for vurdering av hundens generelle helse.
Kortisolkonsentrasjonen i blodet varierer mye iløpet dagen, både hos friske hunder og hunder med Cushings syndrom. Dette er grunnen til at sykdommen ikke kan bekreftes basert på kun èn måling av kortisol. De to vanligste testene som brukes er lav-dose deksametason suppresjonstest og ACTH stimulasjonstest. Det kan være nødvendig å utføre begge testene.
